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Desarrollo de una prueba elisa basada en dominios VNAR anti-TGFβ para la potencial detección de enfermedad renal crónica
Marco Jesús Ku Centurión
TANYA AMANDA CAMACHO VILLEGAS
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
Los protocolos que actualmente se llevan a cabo para establecer el diagnóstico de ERC incluyen pruebas de diversa índole, siendo las invasivas aquellas que ofrecen informacion acerca del grado de daño al riñón en esta afeccion, es por ello, que encontrar estrategias o alternativas menos invasivas o no invasivas que nos permitan relacionar directamente la presencia de un biomarcador con los niveles de daño presentes en el riñón del paciente. Esta es una de las metas en las estrategias de pruebas diagnóstico y que abre la posibilidad de aprovechar el potencial del papel de la citocina TGF-β con los niveles de daño renal asociado a fibrosis. Los vNAR son moléculas inmunes provenientes de especies marinas que desempeñan un papel en la opsonización de diversos antígenos, en nuestro equipo de trabajo se cuenta con uno que es especifico a TGF-β, es por ello que a través de su clonación y expresión en vectores pET28a+(expresión con etiqueta de histidina simple) y pET32a+ (expresión con doble etiqueta de histidina) se logró evaluar su expresión, capacidad de reconocimiento antigénico, linealidad y reconocimiento en una matriz biológica (suero humano). Los resultados nos muestran que la expresión en el sistema de expresión E. coli BL21 D3 con el vector pET32a+ se obtienen niveles mayores en comparación con la cantidad expresada en pET28a+. Así mismo la capacidad de reconocimiento resulta más especifica a la isoforma 1 del TGF-β, demostrándose una aceptable correlación lineal entre la respuesta analítica y concentración de citocina en la prueba de ELISA desarrollada, aún es necesario realizar mas evaluaciones empleando sueros de pacientes con enfermedad que implique procesos fibróticos por lo que los resultados de las evaluaciones en suero dan la pauta para continar con las evaluaciones y posterior validación de esta prueba analítica.
26-08-2021
Tesis de maestría
CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA
Aparece en las colecciones: MAESTRÍA EN CIENCIAS EN INNOVACIÓN BIOTECNOLÓGICA

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