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Inmunogenicidad de particulas pseudo virales del virus de la mancha anular de la papaya presentadoras de un epitope del circovirus porcino tipo 2
BRENDA EUGENIA AGUILERA BAÑUELOS
Abel Gutiérrez_Ortega
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
"Las partículas tipo virus (PTV´s) han demostrado ser excelentes nanomateriales por sus características estructurales y posibilidad de ser expresadas en sistemas distintos. Recientemente se ha estudio su aplicación como plataformas de presentación de epítopes para su uso como adyuvantes en vacunas. La proteína de la cápside del virus de la mancha anular de la papaya (PRSV) se ha expresado exitosamente como una fusión a un péptido de 15 aminoacidos, sin embargo, no se evaluaron los efectos que dicha inserción produjo en el ensamblaje. En el presente trabajo, un epítope del circovirus porcino tipo 2 (PCV2) con características proyectoras fue insertado por fusión genética en tres diferentes ubicaciones en la proteína de la cápside (CP) del PRSV en los extremos amino y carboxilo, así como en un sitio evaluando como de alta antigenicidad, se generaron las estructuras moleculares de las tres proteínas in silico, se expresaron en Escherichia coli y se purificaron mediante precipitación, pero más importante, se demostró que la inserción del péptido influye en el ensamblaje de las partículas derivando su estabilidad y con ello variando la longitud de estas. La versión que mostró generar mayor cantidad de partículas por cantidad de proteína con un tamaño superior a las otras fue la versión con la inserción en el sitio de alta antigenicidad. se generaron las estructuras moleculares de las tres proteínas in silico, se expresaron en Escherichia coli y se purificaron mediante precipitación, pero, más importante, se demostró la formación de PTV´s por microscopía electrónica de transmisión. Se encontró que la inserción del péptido influye en el ensamblaje de las partículas, derivando su estabilidad y con ello variando la longitud de estas. La versión que mostró generar mayor cantidad de partículas por cantidad de proteínas con un tamaño superior a las otras fue la versión con la inserción en el sitio de la alta antigenicidad. Por el contrario, aquellas que alcanzaron menores longitudes, fueron las producidas con la inserción en el extremo carboxilo, las cuales al mismo tiempo fueron las partículas que al administrarse en ratones generaron una reacción antigénica más elevada."
29-01-2016
Tesis de maestría
GENÉTICA
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