Please use this identifier to cite or link to this item: http://ciatej.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1023/443
 Identificación de proteínas inmunogénicas de Mannheimia haemolytica y obtención de proteínas recombinantes para su evaluación como antígenos en ratón
PATRICIA BERENICE RAMIREZ RODRIGUEZ
RODOLFO HERNANDEZ GUTIERREZ
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
"La enfermedad del Complejo Respiratorio Bovino (CRB) es responsable de importantes pérdidas económicas en la industria de engorda bovina, la bacteria Mannheimia haemolytica es uno de los principales agentes etiológicos de esta enfermedad. Dada la dificultad de reaizar un diagnóstico adecuado y la neceisdad de mejorar las vacunas que actualmente se comercializan, el objetivo del presente trabajo consistió en identificar proteínas inmunológicamente dominantes de M. haemolytica y basado en estas proteínas, obtener proteínas recombinantes para su evaluación como antígenos en ratones. Se realizaron ensayos inmunoproteómicos (determinación de proteínas inmunógicamente dominantes mediante proteómica) es decir, se realizron ensayos de tipo western blot en dos dimensiones (2D) con sueros inmunes de bovinos inmunizados con M. haemolytica. Se identificaron dos proteínas inmunogénicas, que fueron identificadas posteriormente mediante espectrometría de masas (MALDI-TOF MS) Mh-P4-OMP, una proteína reportada en la base de datos como de membrana externa modificable por calor, con un peso molecular de 40.52 kDa (gi:45758051) y la Mh P7-LT reportada a su vez como una proteína componente del sistema de trasnporte transmembranal ABC (ATP BindingCassette) especificamente transportador de (Fe+) (gi:197747868) Posteriormente, con base en la secuencia de lso genes que codifican para estas proteínas se diseñaron oligonucleótidos específicos para su amplificación a partir del DNA genómico de M. haemolytica. Se realizaron amplificaciones y lso fragmentos obtenidos fueron clonados en el vector pET-101. Los plásmidos fueorn utilizados para la trasnformación en células electrocompetentes E. coli TOP 10 y E. coli BL21. Despues de la selección de las clonas con lso insertos. Se realizó la inducción y purificación de las proteínas recombinantes mediante cromatografía de afinidad. Posteriormente para evaluar la respuesta inmune se realizó la inmunización de las proteínas en ratones Balb/c.La proteína ABC no tuvo la capacidad de inducir una respuesta de anticuerpos en ratones inmunizados. La proteína OMP si fue capaz de inducir anticuerpos contra esta proteína en los ratones inmunizados"
29-02-2012
Tesis de maestría
CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA
Appears in Collections:MAESTRÍA EN CIENCIA Y TECNOLOGÍA

Upload archives


File SizeFormat 
Patricia Berenice Ramírez.pdf9.99 MBAdobe PDFView/Open