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http://ciatej.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1023/549| Ensamblaje in vitro de partículas pseudovíricas quiméricas y antígenos completos mediante la incorporación de dominios de alfa hélice superenrollada | |
| LORENA ZAPATA CUELLAR | |
| Abel Gutiérrez Ortega | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| " Las partículas pseudovíricas (VLPs) son nanoparticulas que se autoensamblan tras la expresión de una o más proteínas virales. Las VLPs aprobadas como vacunas han demostrado ser seguras y eficaces en los seres humanos. Recientemente , se ha explorado el uso de estas partículas como plataformas presentadoras de antígenos. Los métodos más utilizados hasta el momento para obtener VLPs quiméricas incluyen la fusión genética y la conjugación química, sin embargo, es común que tales métodos provoquen problemas estéricos y de estabilidad de las VLPs o que limiten el tamaño del péptido que se puede acoplar a la nanoparticula, indicando que aún existe la oportunidad de desarrollar métodos alternativos para la obtención de VLPs quiméricas, como el uso de dominio alfa-hélice superenrollada para la encapsulación de proteínas en el interior de VLPs al formar un motivo de interacción de alfa hélice superenrollada. A la fecha, se han estudiado VLPs procedentes de una variedad de virus, entre ellos las VLPs procedentes de potyvirus. Respecto a los potyvirus, se conoce que la proteína de la cápside (CP) contiene los extremos Ny C terminales dispuestos de modo que se exponen en la superficie de partículas virales. Incluso se han llegado a fusionar secuencias en los extremos N y C terminales de cápisdes potyvirales, sin interferir con el proceso de ensamblaje en VLPs. En este trabajo se insertó un dominio de interacción de alfa hélice superenrollada en el extremo N terminal de la CP del virus del grabado de Tabaco (TEV) para la obtención de VLPs quiméricas capaces de asociar antígenos en su superficie. Adicionalmente se insertó un dominio de interacción complementario en la proteína verde flurescente (GFP), que fue empleada como proteína reportera del acoplamiento de los dominios de interacción complementarios presentes en las VLPs y GFP a través de la formación del motivo de alfa hélice superenrollada. Para lo anterior, se generaron dos versiones de GFP insertando un dominio de interacción en el extremo N de la proteína en una versión (GFPEN) y en el extremo C en la otra (GFPEC) se obtuvieron en un versión (GFPEN) y en el extremo C en la otra (GRFPEC) se obtuvieron las 3 proteínas quiméricas purificadas que conservan características similares a las nativas, se determinó la formación de VLPs y se evalúo su función acarreadora de antígenos en macrófago murinos. Se comprobó la capacidad de autoensamblaje de las CP quiméricas, así como su capacidad para favorecer la .." | |
| 18-08-2017 | |
| Tesis de maestría | |
| MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD | |
| Aparece en las colecciones: | MAESTRÍA EN CIENCIAS EN INNOVACIÓN BIOTECNOLÓGICA |
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