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http://ciatej.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1023/552| Ensamble de la proteína capside del virus del jaspeado del tabaco con seis histidinas en partículas pseudovirales con actividad coadyuvante sobre una proteína quimérica altamente inmunogénica | |
| CARLOS ALBERTO MANUEL CABRERA | |
| Abel Gutiérrez Ortega | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| "La obtención de partículas pseudovirales (VLPs) a partir de proteínas de la cápside expresadas de manera recombinante aún representa uno de los principales obstáculos para su uso en nanotecnologías. El entendimiento en el proceso de ensamblaje y el estudio de la estructura de la VLPs es un aspecto importante en el diseño y desarrollo de nuevos acarreadores y adyuvantes. Desde hace varios años se ha intentado usar a los virus de plantas como herramientas para el desarrollo de vectores de expresión, plataformas de presentación de antígenos e incluso como adyuvantes para vacunas.Las partículas virales y pseudovirales de potyvirus, tales como el virus del mosaico de la caña y el virus y de la papa han sido empleadas para el despliegue de antígenos en superficie, mostrando potencia para el desarrollo de plataformas basadas en virus. El presente trabajo explora el proceso de obtención de partículas tipo virus del potyvirus denominado virus del jaspeado del tabaco (TEV) y su potencial aplicación como coadyuvante de una proteína quimérica multiepítope. Para esto, se diseñaron dos construcciones de la proteína de la cápside del virus del jaspedado del tabaco (TEV CP), una versión con etiqueta se deis histidinas en el extremo C-terminal y otra versión nativa sin etiqueta, denominadas His-TEV-CP y TEV-CP, respectivamente. Ambas proteínas se obtuvieron en fracción soluble de lisado celulares de E. coli. La observación de la versión His-TEV-CP en el microscopio electrónico de transmisión demostró el autoensamblaje en partículas pseudovirales flexibles, en algunos casos, con una longitud mayor a 1 um, similares a los viriones del TEV. En contraste, la versión nativa generó partículas de estructura no definida y tamaño menos a 100 nm. Lo anterior genera especulaciones acerca del papel de la etiqueta de seis histidinas en la obtención de filamentos micrométricos, además de habilitar la obtención de partículas del TEV parcialmente puras mediante cromatografía en un solo paso, con un rendimiento en el rango de los mg/L de medio cultivo. Se evalúo la respuesta de anticuerpos en ratones como un indicador del efecto adyuvante de las partículas TEV sobre una proteína quimérica del virus del síndrome respiratorio y reproductivo porcino (PRRSV) denominada PRRSVchim. La proteína PRRSVchim indujo una fuerte respuesta de igG total, demostrando ser un potente inmunógeno. Inesperadamente, la mezcla de proteína PRRSVchim con las partículas pesudovirales del TEV provocó una ..." | |
| 02-03-2018 | |
| Tesis de doctorado | |
| MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD | |
| Aparece en las colecciones: | DOCTORADO EN CIENCIA Y TECNOLOGÍA |
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