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http://ciatej.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1023/891
TRANSFERENCIA DE UNA FERMENTACIÓN DE MATRAZ A MINIBIORREACTOR PARA LA EXPRESIÓN DE UN DOMINIO vNAR RECOMBINANTE | |
Alejandro Bustamante Hernández | |
TANYA AMANDA CAMACHO VILLEGAS | |
Acceso Abierto | |
Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
En este trabajo se realizó la transferencia de una fermentación por lote o en matraz, es decir el pasar el conocimiento y experiencia durante el desarrollo de un proceso con capacidad demostrada a una tecnología receptora, para este trabajo el desarrollo es el sistema de expresión heteróloga de Escherichia coli de un dominio vNAR recombinante en matraz a una tecnología receptora, el sistema de minibiorreactores my-Control ApplikonMR . La transferencia de matraz a minibiorreactor representa una buena aproximación si lo que se busca es caracterizar y/o escalar posteriormente el bioproceso. El cambio que se plantea en este trabajo representa en sí una mejora en términos de agitación, aereación, mezclado, transferencia de calor y oxígeno, sin embargo, en términos de impacto celular debido al efecto del esfuerzo de corte, estabilidad y nivel de estrés pudiera representar un impacto negativo que afectara el metabolismo celular y por lo tanto la expresión de la proteína de interés. El trabajo comenzó por comparar los niveles y características en la expresión del plásmido pET32a+ conteniendo un vNAR denominado T1 (T1-vNAR-pET32a+) y empleando dos cepas de E. coli disponibles, la cepa BL21 y Shuffle. Así como de la exploración de una posible condición que favoreciera a la expresión de proteína soluble. Posteriormente, una vez identificada la cepa y las condiciones más favorables para la expresión se procedió a transferir el bioproceso a minibiorreactor. A nivel de minibiorrector se realizaron cultivos variando la velocidad de agitación en 200, 400 y 600 rpm, manteniendo el resto de los parámetros y condiciones constantes. El presente trabajo confirma la viabilidad de transferir la fermentación de matraz a minibiorreactor así como establecer los parámetros iniciales y condiciones basales de un proceso base que, permitirán un bioproceso y eventualmente el escalamiento del mismo. | |
31-08-2022 | |
Tesis de maestría | |
CIENCIAS MÉDICAS | |
Versión publicada | |
publishedVersion - Versión publicada | |
Aparece en las colecciones: | MAESTRÍA EN CIENCIAS EN INNOVACIÓN BIOTECNOLÓGICA |
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Alejandro Bustamante Hernández.pdf | Tesis de Maestría Alejandro Bustamante Hernández | 36.74 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |