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Sobre-expresión transitoria en hojas separadas de Persea americana c.v Hass mediada por Agrobacterium tumefaciens
Manuela Castro Medina
Rafael Urrea López
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
Este proyecto comprende, por primera vez, el proceso de transformación transitoria en hojas de aguacate c.v. Hass (Persea americana Mill.) permitiendo así futuras aplicaciones en caracterización funcional de genes y mejoramiento genético para obtención de nuevas variedades. Por su apetecido fruto, el cultivo de aguacate tiene alta importancia comercial en el mercado internacional, lo cual se confirma con un incremento sustancial de su consumo en los últimos años, especialmente en los principales importadores; Estados Unidos y la Unión Europea. Siendo México el principal productor y exportador a nivel mundial se recalca la importancia de buscar en este país soluciones para combatir potenciales desafíos ambientales como plagas y cambios climáticos inminentes de un cultivo de explotación univarietal como sucede con el aguacate. Persea americana es un árbol perene, recalcitrante, de larga fase juvenil y hasta el momento no se reporta transformación transitoria en hojas o ningún tejido adulto. Durante este estudio se desarrolló una metodología de transformación de hojas de aguacate mediada por Agrobacterium tumefaciens. Para superar la barrera de recalcitrancia en esta especie, se evaluó el efecto de diferentes parámetros tales cómo la cepa de Agrobacterium, edad de la hoja, pretratamiento de micro-heridas, la fitohormona ácido jasmónico (AJ) infiltración por vacío, surfactantes, densidad óptica (OD600) de Agrobacterium y co-cultivo con AGL1- pBBRacdSgabT. Se encontró que la cepa de Agrobacterium LBA4404 portando el vector RUBY logra transformar las hojas mientras las demás cepas no provocaron signos de transformación. La eficiencia de transformación incrementó ante edades intermedias de la hoja, con la aplicación de microheridas que facilitaron la infiltración de líquido a la hoja en sinergia con aplicación de AJ a 250 μM, Agrobacterium con OD600 de 0.6, con aplicación de 3 vacíos de 0.07 MPa y con aplicación del surfactante Triton X-100 al 0.02%. Este trabajo reporta la primera transformación transitoria en hojas de aguacate, lo cual abre el camino para continuar con el proceso in-planta y explorar así en estudios de caracterización funcional de genes y rutas metabólicas en Persea americana c.v. Hass.
20-02-2023
Tesis de maestría
CIENCIAS AGRARIAS
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Aparece en las colecciones: MAESTRÍA EN CIENCIAS EN INNOVACIÓN BIOTECNOLÓGICA

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